Erinevus lehekülje "Kõrgsurvevedelikkromatograafia" redaktsioonide vahel

Märgis: Viidete kustutamine
Kõrgsurvevedelikkromatograafia aparatuur koosneb viiest põhilisest komponendist: pump, proovisisestussüsteem, kolonn, detektor ning juhtarvuti.
===Pump===
Pumba eesmärk on liikuv faas surudakindlal mobiilne faasvoolukiirusel läbi kromatograafi kindlal voolukiiruselsuruda. Keskmine voolukiirus HPLC puhulsüsteemis on tavalisteks voolukiirusteks 1–2 milliliitrit/minutis (mLml/min). TavalisemadTavaliselt pumbadkasutatakse töötavadpumpasid, rõhuvahemikusmis 400–600võimaldavad avaldada hüdraulilist rõhku kuni 600 [[baar (ühik)|baari]]. Pumbad võimaldavad teha nii isokraatilist elueerimist (eluendiliikuva faasi komponentidekoostis osakaaluanalüüsi ajaskäigus ei muudetamuutu) kui ka gradientelueerimist (eluendiliikuva komponentidefaasi osakaalukoostis muudetaksemuutub ajasanalüüsi käigus). IsokraatiliseIsokraatiline pumbapump on kõige soodsam, kuid teda kasutades puhul peavad [[lahusti|solvendidlahustid]] ehk lahustid olema eelnevalt segatud. ning seeGradientpumbad on kõigekallimad, odavamkuid pump.tänu Gradientpumpnende suudabomadusele ise solventelahusteid segada, agasaab samasneid saab tehakasutada ka isokraatilist elueerimistgradientelueerimiseks.
===ProovisisestussüsteemSisesti===
Sisesti ehk injektor peab vastu pidama kõrgele survele. Väike kogus (tavaliselt 3-100 µl) proovi süstitakse süstlaga läbi spetsiaalse vaheseina või silmuse liikuvasse faasi. Kui on vaja analüüsida suurt hulka proove, siis on asendamatu automaatsisesti (''autosampler''), mille abil on võimalik analüüsida üksteise järel kuni mitusada proovi.
Proov süstitakse mobiilsesse faasi. Tüüpilisemad süsti ruumalad on 4–20 mikroliitrit (uL). Proovisisestus süsteem ehk ''injector'' peab vastu pidama kõrgele survele. Automaatse proovisisestuse ehk ''autosampleri'' kasutamine on hädavajalik, kui on vaja analüüsida kümneid või sadu proove järjest.<ref name="basics">Agilent Technologies, [http://polymer.ustc.edu.cn/xwxx_20/xw/201109/P020110906263097048536.pdf | HPLC Basics, Fundamentals of Liquid Chromatography (HPLC)]. Viimati vaadatud 29.09.2014</ref>
===Kolonn===
Kolonn ja selle omadused on kõige suurem erinevus normaalfaaskromatograafia ja pöördfaaskromatokraafia vahel. Kolonni kutsutakse ka „kromatograafi südameks“<ref name="book">L.R. Snyder, J.J. Kirkland, J.L. Glaych, "Practical HPLC Method Development"(1997), 2nd ed., ISBN 978-0-471-00703-6</ref> ning see eraldab proovi komponendid. Kolonni täidisosakesed (mis normaalfaasi puhul on polaarsed ja pöördfaasi puhul on mittepolaarsed) põhjustavad normaalsetel voolukiirustel vastusurvet. Pump peab mobiilset faasi suruma läbi kolonni ja see tekitab kolonnis kõrget survet.
290

muudatust