Kasutaja:Ivarik/Immunofluorestsents: erinevus redaktsioonide vahel

Eemaldatud sisu Lisatud sisu
Ivarik (arutelu | kaastöö)
Resümee puudub
Ivarik (arutelu | kaastöö)
20. rida:
 
== Immunoreaktsioon ==
Preparaate inkubeeritakse primaarse antikehaga. Korraga saab inkubeerida ka mitme primaarse antikehaga. Antikeha lahustatakse blokeerimislahuses vastavalt antikeha tootja soovitustele. Kui tootja poolt pole täpsustatudtäpsustanud, missuguses [[kontsentratsioon]]is peaks antikeha kasutama, siis oleks mõistlik proovida kontsentratsioone vahemikus 1:50-1:1000. Antikehaga inkubeerimise aeg võib varieeruda vastavalt afiinsusele. Sagedasti inkubeeritakse antikehaga kas 1-2 tundi toatemperatuuril või 4 °C juures üleöö. Otsese immunofluorestsentsi korral võib nüüd edasi minna sulundamise etapi juurde, sest primaarsel antikehal on juba fluorokroom küljes. Kaudse immunofluorestsentsi puhul on tarvis inkubeerida sekundaarse antikehaga. Enne seda peab preparaati hoolikalt pesema, et vähendada sekundaarse antikeha ebaspetsiifilist seondumist. Sekundaarset antikeha võib lahustada kas blokeerimislahuses või pesupuhvris. Sekundaarse antikehaga inkubatsioon peab toimuma pimedas, et vältida fluorokroomi pleegitamist. <ref name="Florian Hoff"/>
 
== Tuuma värvimine ja preparaadi sulustamine ==