Polümeraasi ahelreaktsioon: erinevus redaktsioonide vahel

Eemaldatud sisu Lisatud sisu
Adele (arutelu | kaastöö)
Adele (arutelu | kaastöö)
5. rida:
PCR metoodika töötas 1983.aastal välja Kary Mullis, kes sai selle eest keemias Nobeli preemia 1993.aastal koos Michael Smithiga.
 
PCR metoodika võimaldab ''in vitro'' paljundada konkreetset DNA fragmenti, kasutades selleks termostabiilset DNA polümeraasi. Esimene termostabiilne DNA polümeraas (Taq polümeraas), mida kasutati PCR läbiviimiseks, isoleeriti termofiilsest bakterist ''Thermus aquaticus''. Taq polümeraas on monosubühikuline ensüüm, millel puudub replikatsioonivigu parandav 3’-5’eksonukleaasne aktiivsus. Seetõttu on Taq polümeraasi poolt läbiviidav DNA süntees küllaltki vigaderohke. Selleks, et amplifitseerida kindlat DNA järjestust, peab vähemalt osaliselt teadma uuritava DNA nukleotiidset järjestust. Uuritava DNA regiooniga külgnevatele järjestustele sünteesitakse komplementaarselt kaks lühikest, üksikahelalist DNA fragmenti ehk praimerit, millest üks on komplementaarne kodeeriva ahelaga, teine matriitsahelaga.<ref>1< name="test"/ref>
 
==PCR põhimõte==